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几种中药提取液对小鼠抗疲劳及抗衰老作用的研究

编辑:闫艳 单位:南京师范大学

来源:第十届全国体育科学大会发布日期:2015-07-15 20:21:57浏览:242次

1.研究目的:探索四叶参、黄精、黄芪、楤木提取液对小鼠抗疲劳及抗衰老能力的影响。

2.研究方法:

2.1 四叶参、黄精、黄芪、楤木提取液的制备

烘干:将四叶参、黄精、黄芪、楤木切片,在60℃烘干箱内烘至恒重。

粉碎:将烘干后的四叶参、黄精、黄芪、楤木在粉碎机中分别进行粉碎。

浸泡:分别称取粉碎好的四叶参450g、黄精360g、黄芪135g、楤木180g,所占比例分别为40%、32%、12%、16%。按照药、水比为1:20的比例分别加水9000ml,7200ml,3600ml,2700ml,共加水22500ml,分别放入烧杯内,浸泡68小时。

提取:用微波炉进行提取,提取10分钟。

过滤:微波炉提取后,用四层纱布进行过滤,楤木过滤后还需要用无水乙醇进行再提取、过滤。

浓缩:将滤液用旋转蒸发仪蒸发浓缩,浓缩浓度为0.5g/ml。

将浓缩液装瓶,存放于4℃冰箱备用。

2.2 小鼠负重游泳实验

将30只雄性小鼠随机分成3组,每组10只,分别为高浓度组、低浓度组和对照组。高浓度的提取液浓度为0.25g/ml,低浓度的提取液浓度为0.125g/ml。高浓度组和低浓度组分别灌胃0.2ml/10g的提取液,对照组灌胃0.2ml/10g的生理盐水,每天一次,连续灌胃四周。末次灌胃给药30min后,在小鼠尾根部负荷8%体重的铅丝,置于游泳箱内进行游泳,从放入水中开始计时,观察小鼠游泳至力竭下沉的时间(在水下10s不能游出水面),记录时间,这段时间为小鼠的游泳时间。

2.3 肝糖原和肌糖原含量的测定

    分组与给药同上,对小鼠肝糖原和肌糖原含量进行测定。取新鲜肝脏、肌肉样本用生理盐水漂洗后用滤纸吸干,称重。按样本重量:碱液体积=1:3一起加入试管中,沸水煮沸20min,流水冷却。然后将糖原水解液进一步制备成糖原检测液。按照要求配置空白管、标准管、测定管,最后混匀后煮沸5min,冷却后于620nm波长,1cm光径,空白管调零,测各个管OD值,计算出肝糖原和肌糖原含量。

2.4 血清MDA含量的测定

分组与给药同上,对小鼠 MDA含量进行测定。小鼠眼球取血,离心分离血清。按照要求配置好空白管、标准管、测定管后,用旋涡混匀器混匀,试管口用保鲜薄膜扎紧,用针头刺一小孔,95℃水浴(或用锅开盖煮沸)40分钟,取出后流水冷却,然后3500~4000转/分,离心10分钟(3000转/分以下离心时间需延长,目的使沉淀完全)。取上清,532nm,1cm光径,双蒸水调零,测各管吸光度值,计算出MDA的含量。

3.研究结果:与对照组比较,高浓度组和低浓度组均能延长小鼠的游泳时间,且高浓度组的效果更明显;高浓度组和低浓度组小鼠的肝糖原和肌糖原含量均增多,且高浓度组增多明显;高浓度组和低浓度组小鼠血清MDA含量均减少,且高浓度组减少明显。

4.研究结论:高浓度组和低浓度组的小鼠负重游泳的时间比对照组长,肝糖原和肌糖原的含量比对照组的高,血清MDA的含量比对照组低。这些结果均表明四叶参、黄精、黄芪、楤木的提取液对小鼠的抗疲劳和抗衰老具有一定的作用。提示该中药组方有较高的开发应用价值。

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